第一章 绪论(1)
一、验证的概念与内涵(2)
二、验证的类型(2)
三、药品微生物检测验证的特点与影响因素(3)
(一)微生物学检测对象的特点(4)
(二)微生物学检测的特点(4)
(三)微生物学检测的影响因素(5)
四、药品微生物检测验证技术的内容(5)
第二章 微生物检测实验室的设施与设备验证(7
)
一、实验室设施与验证(7)
(一) 洁净室（无菌室）(8)
(二)毒菌种处理和微生物鉴别局部100级控制室(11
)
(三)抗生素微生物检定、细菌内毒素检查、抑菌实验的半无菌室(
12)
(四)其他室（培养室，试液及培养基的配制室或灭菌室，器皿洗涤、烘干室，
实验室，办公休息室）(12)
二、实验室设备与验证(12)
(一)仪器设备的管理原则(13)
(二)实验室设备的质量保证和管理要求(14)
(三)超净工作台的监控规程与使用指南(22)
三、实验室操作所用玻璃器具（容器）的校正（验证）(23
)
（一）容量瓶容积的校正(23)
（二）移液管(刻度管)容积的校正(24)
(三) 滴定管容积的校正(24)
(四) 校正容量仪器时的注意事项(25)
（五）常见容量仪器的容量允差(26)
（六）微量加样器的校验(26)
第三章 微生物检测用标准物质的使用及管理(28
)
一、概述 (28)
(一)标准品或对照品的来源(28)
(二)标准品或对照品的保管(29)
(三)标准品或对照品的存储和领用(29)
(四)标准品或对照品的销毁及使用记录(29)
(五)定期对标准品或对照品进行抽样检查(29)
(六)特殊的标准品——菌种(29)
二、抗生素标准品(29)
(—)使用与保存(29)
(二)效价复核(30)
(三)效价复核数据的统计学分析实例(32)
(四)效价复核数据的计算机统计处理(35)
三、微生物菌种的使用、保存与管理、验证(36)
(一)制定菌种使用、保藏管理程序 (36)
(二)严格控制菌种的传代、做好保藏工作(37)
(三)常用菌种保藏方法(38)
(四)菌种保藏标签的规范与要求(40)
(五)严格菌种的质量控制，确保菌种的质量(40
)
(六)菌种处理的注意事项与有关记录(41)
四、细菌内毒素标准品与鲎试剂(43)
(一)细菌内毒素国家标准品和工作标准品(43)
(二)细菌内毒素验证品(44)
(三)凝胶鲎试剂灵敏度复核(46)
(四)光度法标准曲线的可靠性试验(49)
第四章 消毒剂的使用及效力验证(51)
一、 消毒剂与灭菌剂的划分(51)
(一)卫生处理与卫生洗涤剂(51)
(二)消毒与消毒剂(51)
(三)灭菌与灭菌剂(52)
二、微生物对消毒因子的敏感性(52)
三、消毒剂的效力等级与消毒效力评价(52)
四、影响消毒剂效力的主要因素(53)
(一)pH(53)
(二)温度(53)
(三)有机物(53)
(四)表面活性剂和金属离子(53)
(五)水(53)
五、消毒剂的作用方式(54)
(一)使蛋白质变性、凝固(54)
(二)破坏或损伤细胞膜(54)
(三)阻断食物摄取和废物排泄(54)
(四)钝化关键酶的活性(54)
六、细菌对消毒剂的耐受性(55)
(一)具耐受性的细菌和不能完全致死的消毒剂剂量(55
)
(二)分泌多聚糖样物质黏附细菌，共同形成生物膜(55
)
(三) 清洁剂之间的交互作用钝化消毒剂效力(55
)
七、消毒剂的选择和交替使用(56)
八、制药工业常用的消毒剂(56)
(一)醇类(56)
(二)酚类化合物(57)
(三)季铵盐类化合物(57)
(四)液体灭菌剂和杀芽孢剂(57)
九、消毒剂的效力确认(59)
(一)确认时需要考虑的因素(60)
(二)现场考察(60)
(三)实验室考察(60)
(四)定量悬浮试验(61)
(五)载体浸泡定量试验(63)
十、消毒剂稀释液的效期确认(63)
十一、培训和安全教育(64)
十二、消毒剂消毒效果验证实验（定量悬浮试验）实例(64
)
(一)验证原理(64)
(二)验证材料(64)
(三)验证方法(定量悬浮试验)(65)
第五章 培养基、缓冲液、稀释剂、淋洗液和试剂的验证(
67)
一、培养基的概念与分类(67)
二、培养基的制备、融化程序的确认及注意事项(67
)
(一)培养基的制备(67)
(二)培养基融化程序的确认(68)
(三)培养基制备应注意事项(69)
三、培养基的储存(70)
四、培养基的质量控制(71)
(一)外观检查(71)
(二)pH检查(72)
(三)培养基的无菌性检查(72)
（四）培养基的灵敏度检查(促菌生长性)(72)
五、染色液与各种生化反应试液的验证(79)
六、缓冲液、稀释液与淋洗液(81)
(一)无菌检查用稀释液、淋洗液及其制备方法(81
)
(二)微生物限度检查用稀释剂及其制备方法(82
)
七、文件管理与标签(82)
八、有效期的确认(83)
九、培养基灵敏度的验证试验实例(84)
(一)无菌检查培养基灵敏度的验证试验实例(84
)
(二)微生物限度检查培养基灵敏度的验证试验实例(85
)
附一 无菌检查用培养基及其制备方法(88)
附二 微生物限度检测用培养基及其制备方法(89
)
附三 微生物限度检测用试药、试液与指示液(92
)
附四 抗生素效价测定用培养基及灭菌缓冲液的制备方法(9
4)
附五 微生物检测用生化试验培养基及试剂的制备方法(96
)
附六 微生物检测用试液、指示液、染色液的配制及染色法(
99)
第六章 灭菌法(101)
一、灭菌方法(101)
(一)湿热灭菌法(102)
(二)干热灭菌法(103)
(三)辐射灭菌法(103)
(四)气体灭菌法(104)
(五)过滤除菌法(104)
(六)无菌生产工艺(105)
二、生物指示剂(105)
(一)制备生物指示剂用微生物的基本要求(106)
(二)生物指示剂的制备(106)
(三)生物指示剂的应用(106)
(四)常用生物指示剂(106)
三、湿热灭菌法验证试验实例(107)
(一)产芽孢梭菌芽孢-生物指示剂验证乳剂类产品的灭菌工艺实例(
107)
(二)生物指示剂验证实例(109)
(三)常用消毒灭菌效果评价实验操作实例(109
)
第七章 药品微生物检验方法的验证(111
)
一、确保药品微生物检测方法验证准确性的关键因素(112
)
(一)验证实验用微生物的种类及其生理特性(112
)
(二)验证用微生物接种液的制备(112)
(三)验证试验条件(113)
二、验证试验的原理与方法(116)
(一) 验证的原理(116)
(二)验证的合格标准(116)
(三)药品无菌检查方法的验证(117)
(四)药品细菌、霉菌及酵母菌计数检查方法的验证(
118)
(五)药检控制菌检查法的验证(119)
(六)药检中各控制菌检测的注意事项(120)
三、验证实验结果的评价与报告(122)
四、验证实验实例(123)
实例(一)氟喹诺酮类药物的无菌检查方法验证(123
)
实例(二)××注射液的无菌检查（薄膜过滤法）方法的验证方案示例(
126)
实例(三）微生物限度检查方法（平皿菌落计数法）的验证方案示例(
129)
实例(四)大肠埃希菌检查方法的验证方案示例(132
)
第八章 微生物检测数据的趋势分析和统计处理(1
34)
一、检测数据的趋势分析(134)
(一)检测数据趋势分析的目的(134)
(二)微生物检测进行趋势分析的常规项目(134)
(三)趋势分析的意义(134)
二、微生物检测数据的统计处理(135)
(一)统计学常用的变异指标数值(136)
(二)正态(常态)分布(曲线)(137)
(三)t检验与t分布(139)
(四)F检验（方差分析）(141)
（五）χ2(读作卡方)分析(142)
三、制备趋势分析图进行分析(144)
四、微生物检测数据的统计处理(146)
(一)特异反应检测值的剔除(146)
(二)t检验实例(148)
(三)F检验实例(149)
(四)χ2检验实例(152)
(五)试验结果的合并计算(153)
五、统计例题的微机运算(157)
(一)配对试验t检验微机运算(158)
(二)多因素F检验微机运算(159)
(三)配对试验χ2(卡方)检验(162)
(四)量反应平行线测定随机区组设计（3.3）法的微机运算(
163)
(五)常规检定中的合并计算微机运算(168)
六、微生物检测数据分析应注意的问题(172)
第九章 有关微生物检测(查)的操作方法(173
)
一、抗生素微生物检定(173)
(一)管碟法(173)
(二)浊度法(176)
二、细菌内毒素检查(179)
(一)凝胶法操作(180)
(二)凝胶半定量试验(183)
(三)光度测定法操作(183)
三、无菌检查(186)
(一)薄膜过滤法(188)
(二)直接接种法(189)
(三)无菌检查结果判断(190)
四、微生物限度检查(191)
(一)供试液的制备(191)
(二)细菌、霉菌及酵母菌计数(192)
(三）控制菌检查(193)
(四)微生物限度检查结果判断(199)
附(一) 《中国药典》(2005年版)(一部)微生物限度标准(
200)
附(二) 《中国药典》(2005年版)(二部)微生物限度标准(
201)
五、鲜乳中抗生素残留量检验(202)
参考文献(203)
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